马云飞和高寒婚礼的当天,来了一个不速之客——“五号特工组”的老朋友老于,恳请他们再次出山,执行一项别人无法完成的任务:追查盗窃美国核武器资料的双料间谍吉川猛夫。为此,高寒做了落跑新娘,跟随欧阳剑平和李智博赶赴云南接受任务,马云飞和何坚也被迫出山,于是“五号特工组”五位成员:语言专家欧阳剑平、爆破专家李智博、特工马云飞、密码专家高寒、“神偷”何坚再次集结上了前线。同时,日本方面派出了他们的杀手锏,酒井朝香——她是酒井美惠子的亲妹妹,一个手腕更加毒辣凶狠的高级女间谍。“五号特工组”出师不利,被吉川猛夫还没有暴露的同伙陷害入狱,五号无奈之下集体越狱……一面躲避美军的追捕,一面追击吉川猛夫,最终揪出了美军内部的叛徒,抢在酒井朝香之前找到了失窃的核武器资料。战事愈演愈烈,前方战场的士兵出现了大规模病毒感染,五号特工组受命调查,路上和这场病毒站的祸首桥本失之交臂。桥本还是个视科学试验高于一切的科学怪人,他给高寒注射了病毒,把她当试验品绑架走,一路细心的保护研究。马云飞、李智博、何坚深入滇缅边境,经过艰难的丛林追击战,摸到了敌人在缅甸境内的生化基地。此时,高寒为了拿到病毒血清,街救前线的大批战士,也差点献出了生命。战事紧急,正面战场物资短缺。蒋介石盯上了阎锡山早年私藏的军火,阎锡山以军火库建造者李阳失踪为由,不为蒋介石提供军需。戴笠不得不再次求助于五号特工组,让马云飞四人潜入山西,寻找军火库建造者李阳的下落。五号特工组利用日军司令风间义博嗜爱中国画的喜好,窃得蒋介石家里的古代名画为诱饵,钓了风间义博上钩。籍由卖画,深入风间义博居住的司令部,趁机偷拍日军晋中会战战斗记录和花名册,此时酒井也来了,马云飞巧妙周旋,在被识破的前夕,顺利逃出日军司令部。五号按图索骥,马云飞、何坚通过假招供的手段,进入康坑归化监狱。俩人费尽周折,终于取得了监狱里犯人领袖朱非的信任,协助他越狱。朱非行动失败,临死前告诉马云飞,自己就是李阳,五号终于抢在日本人之前找到军火库。五号特工组带着宋美龄心爱的国画回到重庆,准备完璧归赵,一下飞机就碰到了来华援助的美国飞虎队队长陈纳德在机场遇袭。五号特工组没来得及脱身,被老于和戴笠堵在了门口。五号从重庆机场枪击现场查起,利用物理、枪械等知识,依靠心理学和推理演绎等手段,从极为有限的线索中还原了枪击现场,并沿着蛛丝马迹,彻底瓦解了日本人了刺杀阴谋。揭开真相后,马云飞等人奉命保护陈纳德来重庆;陈纳德夫人为了确保陈纳德安全,还请来了美国的安全顾问罗特。罗特到达后,对马云飞等人的行动多有指责,而层出不穷的意外,也让五号特工组屡屡陷入被动。马云飞等人几经周折,发现一切事件的真凶,是安全顾问罗特造成的——这家伙是个冒牌货。五号特工组接到中国远征军孙立人将军的邀请,送一份重要的河道图去缅甸,和他们通行的还有随行记者崔媛媛,马云飞的老同学,高寒为此吃醋不已。他们都不知道此时的崔媛媛其实是易容后的酒井朝香,酒井杀害并冒充崔媛媛跟着五号的目的是混入远征军基地,配合日本轰炸机实施轰炸。只有高寒一个人识破了崔媛媛的面目,其他人却都认为她是在吃醋起疑,不相信她的话。当大家一个个被易容的酒井送进陷阱,指引日本轰炸机的篝火即将被点燃的时候,离队许久的欧阳剑平带着陈纳德的救援赶到。酒井朝香重蹈了她姐姐的命运,五号特工组又一次团聚,高寒和马云飞这一对恋人却成为了陌路。

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